近日，深圳大學(xué)化學(xué)與環(huán)境工程學(xué)院周禮杰團(tuán)隊(duì)在期刊《Chemical Engineering Journal》（影響因子15.1，中科院JCR 1區(qū)，TOP期刊）上發(fā)表了題為《Investigating cake layer development and functional genes in formate- and acetate-driven heterotrophic denitrifying AnMBRs》的研究論文。該團(tuán)隊(duì)周禮杰副教授為論文唯一通訊作者，碩士研究生董楠為論文第一作者，深圳大學(xué)為第一作者單位及通訊單位。

異養(yǎng)反硝化已被用于處理化肥、炸藥和金屬精加工部門產(chǎn)生的含硝酸鹽廢水。為驅(qū)動(dòng)異養(yǎng)反硝化而應(yīng)用的傳統(tǒng)碳源，不僅成本高昂，而且可能在無意中導(dǎo)致運(yùn)營中產(chǎn)生的二氧化碳。尋找新的綠色碳源是有必要的。甲酸鹽（一種單碳分子）最近在綠色化學(xué)和環(huán)境工程領(lǐng)域都受到了關(guān)注。甲酸鹽被設(shè)想為碳中和生物經(jīng)濟(jì)的核心。電化學(xué)CO2氣體固定是碳中性甲酸鹽合成的一種有前途的方法。目前，甲酸鹽在廢水處理中的應(yīng)用已有文獻(xiàn)記載。然而，它并不是許多細(xì)菌的理想碳源和能源。目前，甲酸鹽在驅(qū)動(dòng)異養(yǎng)反硝化中的應(yīng)用在文獻(xiàn)中仍未得到充分探索。從可持續(xù)廢水處理的角度來看，厭氧膜生物反應(yīng)器（AnMBR）在廢水處理方面比傳統(tǒng)的活性污泥工藝具有明顯的優(yōu)勢。在為AnMBR開發(fā)的多種膜類型中，平板膜組件因其占地面積小、膜更換方便和高效處理而受到關(guān)注。然而，AnMBR并非沒有挑戰(zhàn)。膜污染以孔隙堵塞和濾餅層形成為特征，阻礙了AnMBR的廣泛采用。

針對(duì)以上問題，本研究以甲酸鈉（人民幣2800.00元/噸，工業(yè)級(jí)）作為非常規(guī)碳源和能源進(jìn)行異養(yǎng)反硝化研究。乙酸鈉（人民幣5400.00元/噸，工業(yè)級(jí)）作為污水處理廠常規(guī)但昂貴的碳源作為對(duì)照實(shí)驗(yàn)。特別地，我們評(píng)估了甲酸鹽進(jìn)料的AnMBR與乙酸鹽進(jìn)料的AnMBR在低C/N比和高C/N比（即2.9，3.7）下的膜污染和功能基因，以探究甲酸鹽在AnMBR脫氮過程中是否有利。在這項(xiàng)研究中，我們使用了專為實(shí)驗(yàn)室應(yīng)用而設(shè)計(jì)的標(biāo)準(zhǔn)商用膜，目的是為中國的小型污水處理廠提供新的見解，特別是在土地受限和人口密集的城市，如中國深圳。未來，我們將根據(jù)本研究獲得的知識(shí)，在類似的廢水處理方案中進(jìn)行大規(guī)模研究。

圖1論文摘要圖

圖2（a）展示了兩個(gè)AnMBRs的TMP變化，使用甲酸鹽作為唯一的碳和能量來源來培養(yǎng)反硝化細(xì)菌，導(dǎo)致TMP的增加比傳統(tǒng)的乙酸鹽慢得多。圖2（b）顯示，乙酸鹽進(jìn)料的污泥粘度（平均80 m Pa.S）明顯高于甲酸鹽進(jìn)料的污泥粘度（平均65 m Pa.S）。高粘度與膜表面污染程度呈正相關(guān)，并降低了膜通量。原子力顯微鏡表明（圖2（c）），乙酸鹽進(jìn)料的濾餅層的Ra和Rq值均高于其對(duì)應(yīng)甲酸鹽進(jìn)料的濾餅層。因此，乙酸鹽進(jìn)料的AnMBR的膜表面比甲酸鹽進(jìn)料的AnMBR粗糙得多。EPS粘附可能是導(dǎo)致濾餅層致密或疏松的主要觸發(fā)因素和機(jī)制，其顆粒在長期膜過濾過程中會(huì)堵塞膜孔或形成濾餅層。圖2（d）顯示，兩種AnMBRs濾餅層中的EPS-蛋白質(zhì)含量幾乎不存在。另一方面，乙酸鹽進(jìn)料的濾餅層中的多糖和核酸含量明顯高于甲酸鹽進(jìn)料的濾餅層。造成這種現(xiàn)象的可能原因可能是甲酸鹽和乙酸鹽的代謝途徑不同。

膜污染是膜技術(shù)在廢水處理中推廣和應(yīng)用的主要障礙。由于膜污染，膜更換是必要的，約占MBR運(yùn)營成本的50%。以上結(jié)果表明，甲酸鹽作為碳源的膜污染比乙酸鹽低，可以降低膜更換頻率和運(yùn)行成本。這項(xiàng)研究展示了實(shí)驗(yàn)室規(guī)模膜的性能，提供了與廢水處理相關(guān)的結(jié)垢機(jī)制的見解。未來，將進(jìn)行全面和中試規(guī)模的膜研究，以進(jìn)一步擴(kuò)展和驗(yàn)證這些結(jié)果。

圖2（a）AnMBR在操作過程中的TMP變化;（b）污泥粘度變化；（c）膜表面的AFM表征;（d）EPS濃度變化（D1：甲酸鹽進(jìn)料；D2：乙酸鹽進(jìn)料）

采用16S rRNA基因和宏基因組測序分析了膜組件中濾餅層中的微生物種群和功能基因。EPS在生物膜形成中發(fā)揮著重要作用，exoP、pelABCDEFG、pslAEFGHJ、vpsMNO、wza、gfcE是胞外多糖生物合成相關(guān)基因（https://www.kegg.jp/kegg/pathway.html）。碳水化合物活性酶（CAZymes）在去除生物膜和胞外多糖（EPS）的工業(yè)過程中極為重要，包括糖苷水解酶（GHs）、糖苷轉(zhuǎn)移酶（GTs）、多糖裂解酶（PLs）、碳水化合物酯酶（CEs）和輔助氧化還原酶類（AAs）（https://www.cazy.org/）。

在門水平（圖3a），在甲酸鹽進(jìn)料的AnMBR濾餅層樣品中，從I期到II期，Bacteroidetes的豐度從33%下降到12%，而Proteobacteria的豐度從20%增加到29%。對(duì)于乙酸鹽進(jìn)料的AnMBR濾餅層樣品，Bacteroidetes的豐度從42%增加到56%，而Proteobacteria和Firmicutes的豐度分別從19%下降到5%和從9%下降到5%。據(jù)報(bào)道，Proteobacteria和Firmicutes通過有效分解大分子和芳香族蛋白物質(zhì)來降低膜污染特性。MAG_7（門：Firmicutes）、MAG_16和MAG_34（門：Proteobacteria）都含有CAZYmes，它們在甲酸鹽進(jìn)料的AnMBR中更為主要。MAG_1（門：Cloacimonadota）在II期成為甲酸鹽進(jìn)料的主要MAG，占30%（圖3（b））。已知該門的成員通過β-氧化降解具有四個(gè)或更多碳原子的有機(jī)物，并且能夠使用氫或甲酸鹽作為能源。MAG_1不包含EPS合成基因，但含有CAZymes。

在甲酸鹽進(jìn)料的AnMBR中，Lentimicrobium（MAG_2）從10%下降到1.8%，但在乙酸鹽進(jìn)料的AnMBR中從17%增加到38%。Lentimicrobium是一種碳水化合物發(fā)酵細(xì)菌。此外，在科水平上，Anaerolineae（MAG_3）在甲酸鹽進(jìn)料中從7.6%下降到3.0%，在乙酸鹽進(jìn)料中從10%增加到15%，它可能通過細(xì)胞外PS的排泄或作為先鋒物種對(duì)加速污泥絮凝體的形成產(chǎn)生重大影響。Lentimicrobium和Anaerolineaceae都是具有DNRA能力的細(xì)菌，可以合成EPS，這可能導(dǎo)致乙酸鹽進(jìn)料的AnMBR中更嚴(yán)重的膜污染。同時(shí)，它們還含有CAZymes，可以降解復(fù)雜的碳水化合物。因此，我們進(jìn)一步計(jì)算了甲酸鹽和乙酸鹽進(jìn)料的EPS生物合成基因和CAZYmes的總豐度，圖4（a）可以看出，甲酸鹽進(jìn)料的AnMBR具有較少的EPS生物合成基因和更多的降解復(fù)雜EPS的酶。這一結(jié)果與以下觀察結(jié)果一致：當(dāng)甲酸鹽被用作反硝化的碳源時(shí)，產(chǎn)生的結(jié)垢較少。

氮功能基因顯示，甲酸鹽進(jìn)料的AnMBR具有更多的DEN基因（圖4（b））。隨著C/N比例的增加，乙酸鹽進(jìn)料的AnMBR可能積累了更多的DNRA細(xì)菌，而甲酸鹽進(jìn)料的AnMBR可能積累了更多的反硝化細(xì)菌（圖4（c））。圖4（d）顯示了基于KEGG的主成分分析（PCA）。最重要的是，甲酸鹽進(jìn)料和乙酸鹽進(jìn)料的PCA趨勢不同。甲酸鹽進(jìn)料的PC1和PC2均減少，乙酸鹽進(jìn)料的PC1增加，PC2減少。這也可能表明在兩個(gè)反應(yīng)器中形成的不同膜污染趨勢。

圖3（a）豐度前15%物種在門水平上的相對(duì)豐度；（b）豐度前15%的MAG（D1：甲酸鹽進(jìn)料；D2：乙酸鹽進(jìn)料）

圖4（a）EPS生物合成基因和CAZYmes相關(guān)基因的豐度；（b）參與反硝化和DNRA的氮循環(huán)基因的百分比；（c）隨著C/N比的增加，甲酸鹽和乙酸鹽對(duì)可加重膜污染的DNRA細(xì)菌的變化；（d）細(xì)菌群落的PCA分析（D1：甲酸鹽進(jìn)料；D2：乙酸鹽進(jìn)料）。

這項(xiàng)研究中發(fā)現(xiàn)了甲酸鹽可以由二氧化碳生產(chǎn)得來，在實(shí)驗(yàn)室規(guī)模下具有良好的異養(yǎng)反硝化潛力。甲酸鹽進(jìn)料的AnMBR表現(xiàn)出顯著的TN去除率，具有更多的DEN基因和更多的CAZymes來降低膜污染（Candidatus Cloacimonadota、Azospirillu物種豐度顯著增加）。然而，乙酸鹽進(jìn)料的AnMBR以Anaerolineae和Lentimicrobium屬為主，具有較多的DNRA基因和EPS生物合成基因，這可能導(dǎo)致在出水中NH4+-N的出現(xiàn)和更嚴(yán)重的膜污染。未來還將在類似的廢水處理中使用全/中試規(guī)模的膜，以更好地彌合本研究中實(shí)驗(yàn)室規(guī)模的膜的結(jié)果與實(shí)際應(yīng)用之間的差距。

這項(xiàng)工作得到了廣東省基礎(chǔ)與應(yīng)用基礎(chǔ)研究基金、深圳市自然科學(xué)基金的支持。

原文鏈接：https://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S1385894724011082

（來源 化學(xué)與環(huán)境工程學(xué)院）